肠毒性大肠杆菌gspD基因敲除以及对LT毒素分泌的影响

本研究利用λRed重组系统构建了肠毒性大肠杆菌(ETEC)H10407菌的gsp D基因敲除株,并利用PCR和测序技术进行了验证。随后对gsp D基因敲除株和野生株生长曲线进行测定,并利用Western Blot技术对培养上清液和细胞沉淀中的LT毒素分别进行检测。发现gsp D基因敲除对ETEC H10407生长无显著影响,野生型大肠杆菌的LT毒素不仅存在于培养上清液中,还存在于细胞沉淀,而gsp D基因敲除株的LT毒素仅在细胞沉淀中被检测到。本研究的结果表明gsp D基因敲除的ETEC,其LT毒素在细菌细胞内积累并不释放至细胞外,说明Ⅱ型分泌系统(T2SS)中的gsp D基因对调控LT毒素分泌至细胞外起到了关键作用。