| Ad5-knob蛋白在大肠杆菌中可溶性表达及其活性检测 |
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| 引用本文： | 赵颜忠,陈玉祥,文路,刘霆,朱晒红.Ad5-knob蛋白在大肠杆菌中可溶性表达及其活性检测[J].中国病毒学,2005,20(2):193-196. |
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| 作者姓名： | 赵颜忠 陈玉祥 文路 刘霆 朱晒红 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅三医院医学实验中心,湖南长沙,410013 |
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| 摘 要： | 采用PCR技术, 从AdEasy-1质粒DNA中获得knob全长序列, 克隆入pGEM-T vector中.DNA测序鉴定后, 构建pQE-30/knob重组表达载体, 转化大肠杆菌M15 pREP4),IPTG诱导表达腺病毒5型纤维蛋白的knob功能域(Ad5-knob), SDS-PAGE分析,表达产物主要以可溶性蛋白的形式存在于细菌裂解液上清之中.经Ni2+-NTA亲和层析一步分离纯化后,洗脱产物中Ad5-knob蛋白纯度超过95%.N-端氨基酸测序证实了纯化产物为Ad5-knob蛋白,细胞受体结合实验检测到所得蛋白能够与Hela细胞上的相应受体特异性结合.上述结果表明在大肠杆菌中已经高效表达了可溶性Ad5-knob蛋白,一步即纯化该蛋白,并具有良好的生物活性,为其下阶段的深入研究提供了重要的实验材料.
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| 关 键 词： | 腺病毒 原核表达 knob蛋白 活性检测 |
| 文章编号： | 1003-5125(2005)02-0193-04 |
| 修稿时间： | 2004年10月25 |
Soluble Expression, Purification and Characterization of Ad5-knob Protein |
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| ZHAO Yan-zhong,CHEN Yu-xiang,WEN Lu,LIU Tin,ZHU Xi-hong.Soluble Expression, Purification and Characterization of Ad5-knob Protein[J].Virologica Sinica,2005,20(2):193-196. |
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| Authors: | ZHAO Yan-zhong CHEN Yu-xiang WEN Lu LIU Tin ZHU Xi-hong |
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