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短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因启动子的克隆、鉴定及其应用
引用本文:杨春晖,王海燕.短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因启动子的克隆、鉴定及其应用[J].遗传,2007,29(7):874-880.
作者姓名:杨春晖  王海燕
作者单位:四川大学生命科学学院, 四川省分子生物学及生物技术重点实验室, 成都 610064
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:利用TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)从短小芽孢杆菌基因组中扩增到碱性蛋白酶基因编码区上游的启动子片段。对该片段的序列测定和分析表明, 此片段长797 bp, 但与基因表达有关的序列长约390 bp。对启动子片段进行不同长度的缺失突变, 以获得最小的基因启动子片段, 结果表明, 该基因起始密码子上游约160 bp的DNA片段就可以启动基因的表达。将含有该片段的碱性蛋白酶基因WApQ3插入大肠杆菌-芽孢杆菌穿梭质粒载体pSUGV4中, 构建了碱性蛋白酶基因表达质粒pSUBpWApQ3。将该质粒分别转入枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌中表达, 可在胞外检测到碱性蛋白酶活性, 最高酶活分别为466.5 U/mL和3060 U/mL。

关 键 词:碱性蛋白酶  基因启动子  基因表达  枯草芽孢杆菌  短小芽孢杆菌  
收稿时间:2006-10-26
修稿时间:2006-10-262006-11-27

Cloning, characterization and application of the promoter of alkaline protease gene in Bacillus pumilus
YANG Chun-Hui,WANG Hai-Yan.Cloning, characterization and application of the promoter of alkaline protease gene in Bacillus pumilus[J].Hereditas,2007,29(7):874-880.
Authors:YANG Chun-Hui  WANG Hai-Yan
Institution:College of Life Science, Sichuan University, Sichuan Key Laboratory of Molecular Biology and Biotechnology, Chengdu 610064, China
Abstract:
Keywords:Bacillus pumilus  Bacillus subtilis  alkaline protease  promoter  gene expression
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