| 用P.pastoris表达L-阿拉伯糖异构酶及其酶活性分析 |
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| 引用本文： | 陈丽萍,崔艳艳,张爱联.用P.pastoris表达L-阿拉伯糖异构酶及其酶活性分析[J].生物技术,2013,23(1):34-37. |
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| 作者姓名： | 陈丽萍 崔艳艳 张爱联 |
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| 作者单位： | 1. 海南大学农学院,海南海口,570228
2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南海口571101 |
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| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:用毕赤酵母表达L-阿拉伯糖异构酶。方法:用PCR法扩增大肠杆菌的L-阿拉伯糖异构酶基因,构建含L-阿拉伯糖异构酶基因的毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K-ai。通过电转法将pPIC9K-ai转化毕赤酵母GS115基因组。先筛选出高G418抗性的克隆,然后再从高拷贝的克隆中筛选出高表达重组L-阿拉伯糖异构酶的重组子作为工程菌GS115(pPIC9K-ai)。结果:在甲醇诱导下,摇瓶发酵GS115(pPIC9K-ai)3d,分泌表达L-阿拉伯糖异构酶32 mg/L。结论:毕赤酵母表达的L-阿拉伯糖异构酶具有转化D-半乳糖为D-塔格糖的生物活性。每升GS115(pPIC9K-ai)发酵液能转化D-半乳糖生成30 mgD-塔格糖。
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| 关 键 词： | L-阿拉伯糖异构酶 毕赤酵母 基因表达 酶活性 D-塔格糖 |
Expression of L-Arabinose Isomerase in P.pastoris and Its Enzyme Activity Analysis |
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| CHEN Li-ping
,
CUI Yan-yan
,
ZHANG Ai-lian.Expression of L-Arabinose Isomerase in P.pastoris and Its Enzyme Activity Analysis[J].Biotechnology,2013,23(1):34-37. |
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| Authors: | CHEN Li-ping CUI Yan-yan ZHANG Ai-lian |
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| Institution: | 1.College of Life Science and Agriculture,Hainan University,Haikou 570228,China; 2.Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Key Laboratory of Biology and Genetic Resources of Torpical Crops,Ministry of Agriculture,Haikou 571101,China) |
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