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| HBV prec/c shRNA慢病毒真核表达载体的构建和鉴定 | |
| 引用本文： | 王朝莉,李丽,陈果,杨致邦,唐恩洁,杨尚君.HBV prec/c shRNA慢病毒真核表达载体的构建和鉴定[J].中国微生态学杂志,2011,23(4):365-366,369. |
| 作者姓名： | 王朝莉 李丽 陈果 杨致邦 唐恩洁 杨尚君 |
| 作者单位： | 1. 重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016;川北医学院分子生物学研究所,四川,南充,637007 2. 川北医学院分子生物学研究所,四川,南充,637007 3. 重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016 |
| 摘 要： | 目的构建针对HBV prec/c区的shRNA真核表达载体psiHBV,感染HepG2 2.15细胞后观察其对HBeAg表达的抑制作用,为探讨防治HBV感染的新措施提供实验依据。方法针对HBV prec/c基因序列,构建shRNA表达载体psiHBV1、psiHBV2和无关序列psiHBVc。psiHBV与慢病毒辅助系统质粒共转染293T细胞组装慢病毒颗粒后,感染HepG2 2.15细胞,RT-PCR检测prec/c mRNA的转录,微粒子化学发光分析仪(MEIA)检测细胞上清和细胞裂解液中HBeAg表达。结果重组质粒双酶切和测序鉴定与预期结果相符合;组装慢病毒颗粒感染HepG2 2.15细胞后,prec/c mRNA转录降低;与对照组比较,HBeAg的表达水平也显著降低,病毒颗粒对HBeAg表达的抑制作用差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建针对HBVprec/c的慢病毒载体psiHBV1、siHBV2,慢病毒介导的RNA i能抑制HBV表达,为应用RNA干扰技术治疗乙型肝炎提供了实验依据。 |
| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 prec/c基因 RNAi慢病毒表达载体 HBeAg |
Construction and appreciation of eukaryotic expression vector of HBV prec/c shRNA |
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| WANG Chao-li,LI Li,CHEN Guo,YANG Zhi-bang,TANG En-jie,YANG Shang-jun.Construction and appreciation of eukaryotic expression vector of HBV prec/c shRNA[J].Chinese Journal of Microecology,2011,23(4):365-366,369. | |
| Authors: | WANG Chao-li LI Li CHEN Guo YANG Zhi-bang TANG En-jie YANG Shang-jun |
| Institution: | WANG Chao-li1,2,LI Li2,CHEN Guo2,YANG Zhi-bang1,TANG En-jie2,YANG Shang-jun2(1.Department of Pathogen Biology,Chongqing Medical University,Chengqing 400016,China,2.Lnstitue of Molecular Biology,North Sichuan Medical College,Nanchong 637007,China) |
| Abstract: | Objective To investigate new measures to prevent and cure the infection of hepatitis B virus and construct eukaryotic expression vectors shRNA aiming directly at the pre-core gene sequence of hepatitis B virus through observing its effect on HBeAg expression in HepG22.15 cells.Method The shRNA express vectors of psiHBV1,psiHBV2 and psiHBVc aiming directly at the pre-core gene sequence of hepatitis B virus were constructed.After psiHBV with lentiviral vector auxilary system was transfected into 293T cells,th... |
| Keywords: | HBeAg |
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