不同信号肽及其组合对果聚糖蔗糖酶异源表达的影响 |
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引用本文: | 王茂军,色依德·斯马依,蔡逸安,李庆刚,路福平,李玉.不同信号肽及其组合对果聚糖蔗糖酶异源表达的影响[J].中国生物工程杂志,2023(5):37-44. |
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作者姓名: | 王茂军 色依德·斯马依 蔡逸安 李庆刚 路福平 李玉 |
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作者单位: | 工业发酵微生物教育部重点实验室天津科技大学生物工程学院 |
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基金项目: | 国家重点研发计划(2021YFC2100402)资助项目; |
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摘 要: | 为了实现果聚糖蔗糖酶在解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens 018(简称G3)中的高效表达,选择来源于不同芽孢杆菌的4个果聚糖蔗糖酶基因lsLich、lsAmy、lsSub和lsMega进行异源表达,并将课题组前期确定的对碱性蛋白酶酶活提升较高的5种信号肽进行筛选和组合。其中来源于地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis RN-01的lsLich在重组菌株G3/pLY-2-lsLich中的酶活力最高,酶活力为62.73 U/mL。以LS-Lich作为目的蛋白筛选单信号肽和双信号肽,其中信号肽SPDacB和SPAmyE组合的重组菌株G3/pLY-2-SDA-ls酶活最高,胞外酶活达到125.76 U/mL,较重组菌G3/pLY-2-SD-ls和G3/pLY-2-SA-ls分别提高了31.3%和39.2%,较原始菌株提高了100.49%。该结果表明双信号肽较单信号肽有助于提高LS-Lich的分泌量,同时信号肽组合顺序不同也产生一定的差异。
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关 键 词: | 信号肽 果聚糖蔗糖酶 解淀粉芽孢杆菌 异源表达 |
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