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| Cry1Ac基因载体构建及其在枯草芽孢杆菌中的杀虫活性表达 | |
| 作者姓名： | 刘济宁 刘贤进 余向阳 彭正强 |
| 作者单位： | 江苏省农业科学院 |
| 基金项目： | 国家"863"项目(2002AA244041);江苏省自然科学基金项目(BK2003117) |
| 摘 要： | 根据苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis HD-73基因Cry1Ac和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis木糖诱导型启动子PxylR序列, 分别设计2对特异引物Cry1Ac F/R和Pxy F/R,扩增获得了完整的启动子PxylR和Cry1Ac基因序列,进一步以上述产物混合物为模板,以Pxy F/Cry1Ac R作引物进行重迭PCR,获得了载体PxylR-Cry1Ac,经SphⅠ和BamHⅠ完全酶切后,将PxylR-Cry1Ac插入大肠杆菌-苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT315,重组表达质粒pCry1Ac315转化枯草芽孢杆菌感受态细胞。工程菌株质粒酶切电泳分析、SDS-PAGE电泳分析和杀虫生物活性测定结果证实了Cry1Ac基因的导入及其在枯草芽孢杆菌JAAS01D中的有效表达。 |
| 关 键 词： | 苏云金芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 重迭PCR Cry1Ac基因 杀虫活性 |
| 文章编号： | 0454-6296(2005)03-0342-05 |
| 修稿时间： | 2004-06-01 |
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