| 水稻叶绿体基因文库的构建和精细限制图谱的制作 |
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| 引用本文： | 赵衍 柴建华. 水稻叶绿体基因文库的构建和精细限制图谱的制作[J]. 遗传学报, 1991, 18(2): 149-160 |
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| 作者姓名： | 赵衍 柴建华 |
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| 作者单位： | 杭州大学生物系，杭州大学生物系，杭州大学生物系，杭州大学生物系，杭州大学生物系，复旦大学遗传学研究所，复旦大学遗传学研究所 杭州 310029，杭州 310029，杭州 310029，杭州 310029，杭州 310029，上海，上海 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，浙江省科委基金，国家教委复量大学遗传工程开放实验室的资助 |
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| 摘 要： | 水稻幼叶在加有高浓度抗坏血酸的缓冲液中匀浆,以获得完整的叶绿体,从中分离到ctDNA得率高达100μg/100g叶,纯度足以用于限制性核酸内切酶分析。ctDNA经Mbo I部分酶解得到的片段克隆到载体pcos 2 EMBL的Bam HI位点,重组DNA经体外包装后感染宿主菌,筛选表型Tc~5Km~R的重组子,通过计数克隆有效率达5×10~4重组菌落/1微克插入DNA。用λ-末端酶对重组环状双链DNA在cos位点切成线性分子,产生两个(ON-L及ON-R)可供标记和杂交的末端,线性Cosmid DNA经限制酶部分消化,凝胶电泳分离,干燥凝胶放射自显影,得到了6种限制性核酸内切酶的限制图谱。水稻ctDNA全长为129.5kb,在ctDNA上Pvu Ⅱ、Sal Ⅰ、Pst Ⅰ、Hind Ⅲ、Eco RI及Bam HI的切点分别为11、12、17、37、67和44个,1R A和B为21.7kb,LSC为73.7kb,SSC为12.4kb。
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| 关 键 词： | 水稻 叶绿体 基因文库 限制图谱 |
Construction of Cosmid Library and Detailed Physical Map of Rice Chloroplast |
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| Zhao Yan Weng Xinghua Zou Qin Shen Guifang Tang Su. Construction of Cosmid Library and Detailed Physical Map of Rice Chloroplast[J]. Journal of Genetics and Genomics, 1991, 18(2): 149-160 |
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| Authors: | Zhao Yan Weng Xinghua Zou Qin Shen Guifang Tang Su |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rice Chloroplast DNA Cosmid library Restriction map |
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