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葡萄病毒B的RT-PCR检测技术研究
引用本文:杨相昆,田海燕,牛建新,王林,代永欣.葡萄病毒B的RT-PCR检测技术研究[J].生物技术通报,2010(5).
作者姓名:杨相昆  田海燕  牛建新  王林  代永欣
作者单位:1. 石河子大学农学院园艺系,石河子,832003;新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,石河子,832003;新疆农垦科学院,石河子,832003
2. 新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,石河子,832003;新疆农垦科学院,石河子,832003
3. 石河子大学农学院园艺系,石河子,832003;新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,石河子,832003
基金项目:国家自然科学基金资助项目,兵团科委项目 
摘    要:旨在建立适合葡萄的葡萄病毒B的RT-PCR检测技术。从感染葡萄病毒B的葡萄皮层中提取总RNA,以其为模板合成cDNA第一链,并利用两对引物分别进行PCR扩增;回收PCR特异扩增产物,与pUCm-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定。结果显示,两对引物均能获得与预期片段大小一致长约460 bp和470 bp的扩增产物扩增片段序列与已报道GVB序列(序列号:X75448)的核苷酸同源性均为81%,经反复多次试验证实,利用总RNA为模板合成cDNA并进行PCR扩增检测GVB是准确、可靠的。

关 键 词:葡萄病毒B  检测  重组质粒  序列  同源性

Study on the Detection of Grapevine Virus B by RT-PCR
Yang Xiangkun,Tian Haiyan,Niu Jianxin,Wang Lin,Dai Yongxin.Study on the Detection of Grapevine Virus B by RT-PCR[J].Biotechnology Bulletin,2010(5).
Authors:Yang Xiangkun  Tian Haiyan  Niu Jianxin  Wang Lin  Dai Yongxin
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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