| 利用酵母双杂交系统筛选水稻类受体激酶OsWAK50胞内域相互作用蛋白 |
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| 作者姓名： | 孙丽静 张芊 路铁刚 孙颖 |
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| 作者单位： | 河北师范大学分子细胞生物学研究所,河北省分子细胞生物学重点实验室,石家庄 050016;中国农业科学院生物技术研究所,北京 100081;中国农业科学院生物技术研究所,北京 100081;河北师范大学分子细胞生物学研究所,河北省分子细胞生物学重点实验室,石家庄 050016 |
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| 基金项目： | 国家转基因生物新品种培育重大专项资助项目(2008ZX08001-003)和国家自然科学基金资助项目(30800701) |
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| 摘 要： | 细胞壁连接的类受体激酶(wall-associated kinase,WAK)是植物细胞中一类特有的类受体激酶基因亚家族,因其胞外域与细胞壁紧密相连而得名．水稻中共有125个OsWAK基因,OsWAK50编码的蛋白质具有胞外域、跨膜域和激酶域,呈现典型的WAK样受体激酶特征．首先通过对OsWAK50-GFP融合蛋白的观察发现OsWAK50定位于细胞膜并且与细胞壁偶联．进而通过酵母双杂交系统筛选到了20个可能与OsWAK50胞内域相互作用的候选蛋白,并通过一对一酵母转化验证了OsSK4、OsSWIB和OsSWI3C全长均可与OsWAK50胞内域相互作用．进一步分析显示,OsSWIB能够直接与OsWAK50激酶域互作,而OsSK4和OsSWI3C与OsWAK50胞内域的互作是依赖于OsWAK50 C端的．研究还表明,OsSK4和OsSWIB亦能与OsWAK50同源基因OsWAK53a结合,而OsSWI3C则不能与OsWAK53a结合．双分子荧光互补实验证明,OsSK4与OsWAK50和OsWAK53a能够在植物体内发生互作．以上结果为阐明OsWAK50发挥功能的分子机制提供了重要线索．
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| 关 键 词： | 水稻 细胞壁连接的类受体激酶(WAK) 酵母双杂交 蛋白质相互作用 |
| 收稿时间： | 2011-08-05 |
| 修稿时间： | 2011-11-29 |
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