| 刺山柑70 kD热休克蛋白基因克隆及原核表达 |
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| 作者姓名： | 栾东东 董玉芝 |
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| 作者单位： | 1. 新疆农业大学,林学与园艺学院,乌鲁木齐,830052
2. 新疆农业大学,林学与园艺学院,乌鲁木齐,830052;新疆农业大学,农业生物技术重点实验室,乌鲁木齐,830052 |
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| 基金项目： | 国家环保局环境保护项目 |
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| 摘 要： | 以干旱区特有的抗逆性植物刺山柑为材料,利用RT-PCR结合cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)方法,克隆了一个HSP70基因,将该基因进行原核表达,通过对大肠杆菌进行温度胁迫实验,并计算存活率来验证该基因对细胞的保护作用.结果表明:该基因全长2 202 bp,开放阅读框共1 950 bp,编码649个氨基酸,表达产物分子量为71.044 6 kD;序列分析表明,该基因属于HSP70基因家族,将该基因命名为CsHSP70,并提交到GenBank,登录号为EU574936.构建了CsHSP70基因的原核表达载体,并使重组质粒pGEX-4T-2-CsHSP70在大肠杆菌中异源表达,对大肠杆菌进行温度胁迫实验结果显示,在高温(50℃)和低温(4℃)条件下,转重组质粒的大肠杆菌在两种胁迫下存活率均高于对照,说明在温度胁迫下CsHSP70对大肠杆菌细胞具有保护作用.
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| 关 键 词： | 刺山柑 热休克蛋白 原核表达 |
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