t-PA cDNA的克隆及其在毕赤酵母中的表达 |
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引用本文: | 涂宣林,朱运松,宋后燕.t-PA cDNA的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J].生物工程学报,1998,14(4):439-444. |
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作者姓名: | 涂宣林 朱运松 宋后燕 |
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作者单位: | 上海医科大学分子遗传学研究室 上海 200032 |
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摘 要: | 应用PCR方法,在t-PA cDNA5'端引入合适的限制酶位点和酵母分泌信号肽,与酵母表达载体pPIC9重组,构建表达质粒pSTE-Y,利用LiCl转化法转化酵母菌YS108,在MM和MD平板上筛选表型,PCR筛选t-PA cDNA与酵母染色体整合而形成的阳性克隆,阳性克隆经甲醇诱导表达后,用SDS-PAGE证明表达产物的分子量为6kDa左右,用酪蛋白板溶圈法测定t-PA的活性。Mut^s表型菌表
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关 键 词: | 纤溶酶原激活剂 t-PA 酵母 cDNA 质粒 重组 |
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