| 人蛋白质二硫键异构酶Cdna基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 高音,杨志伟,华振玲,高虹万平,黎红晔.人蛋白质二硫键异构酶Cdna基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].生物工程学报,1999,15(3):349-354. |
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| 作者姓名： | 高音 杨志伟 华振玲 高虹万平 黎红晔 |
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| 作者单位： | 首都师范大学生物系 北京 100037 |
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| 基金项目： | 北京市自然科学基金,北京市科技新星计划 |
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| 摘 要： | 从人胚胎肝组织中分离纯化出总RNA，在总RNA中提取mRNA，经逆转录得到cDNA第一条链，并以之为模板和相应寡聚脱氧核苷酸为引物．进行PCR合成人蛋白质二硫键异构酶(Proteim disulfide isomerase，PDI)cDNA基因，将所得cDNA克隆到质粒pUCl8上，转化大肠杆菌DH5a细胞，进行诱导表达筛选和活性筛选。将筛选的基因克隆到载体pBV220上，在大肠杆菌细胞中表达，产物以溶解形式在胞浆中表达。表达产物经硫酸铵分级沉淀和DEAE Sepharose Fast Flow柱层析分离，产物的纯度与活性分别为90％、1100u／g。
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| 关 键 词： | 蛋白质二硫键异构酶，基因克隆和表达 |
Cloning and Expression of Human Protein Disulfide Isomerase cDNA in Escherichia coli Supported by the Beijing Municipal Natural Science Fundation (No.5962006). |
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| Gao Yin,Yang Zhiwei,Hua Zhenling,Gao Hong,Wan Ping,Li Hongye.Cloning and Expression of Human Protein Disulfide Isomerase cDNA in Escherichia coli Supported by the Beijing Municipal Natural Science Fundation (No.5962006).[J].Chinese Journal of Biotechnology,1999,15(3):349-354. |
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| Authors: | Gao Yin Yang Zhiwei Hua Zhenling Gao Hong Wan Ping Li Hongye |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Protein disulfide isomerase gene cloning and expression |
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