Leifsonia sp.ZF2019中一种新型耐木糖β-木糖苷酶的表达与特征

【目的】从栀子灰蝶幼虫分离的Leifsonia sp. ZF2019菌株中克隆表达出一种新型β-木糖苷酶Xyl4900，并研究其酶学性质，以期为开发适用于工业生产的β-木糖苷酶提供参考。【方法】采用生物信息学分析技术分析Leifsonia sp. ZF2019菌株的β-木糖苷酶Xyl4900基因并在大肠杆菌中表达了该基因，纯化并研究了其酶学性质。【结果】Xyl4900与GH3家族的β-葡萄糖苷酶同源性高，但带有β-木糖苷酶结构域，可特异性水解对硝基苯基β-D-吡喃木糖苷（p NPX），是一种新型β-木糖苷酶。酶学特性分析显示，Xyl4900在45℃和pH 7.0的条件下酶活性最高，且在pH 6.0–9.0的范围内孵育14 h，仍保持80%以上的酶活力。除Cu²⁺外，其他金属离子（2.5 mmol/L）对Xyl4900酶活力无明显影响，且对低浓度有机溶剂（5%V/V）有较强耐受性。此外，在20%（W/V） NaCl或100mmol/L木糖溶液中Xyl4900的酶活性仍高于50%，表现出较好的盐和木糖耐受性。动力学参数分析显示，Xyl4900的K_m