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ACC氧化酶和ACC合成酶反义RNA融合基因导入番茄和乙烯合成的抑制
引用本文:熊爱生,姚泉洪,李贤,范惠琴,彭日荷. ACC氧化酶和ACC合成酶反义RNA融合基因导入番茄和乙烯合成的抑制[J]. 分子细胞生物学报, 2003, 36(6): 428-434
作者姓名:熊爱生  姚泉洪  李贤  范惠琴  彭日荷
作者单位:上海市农业遗传育种重点实验室,上海市农业科学院生物技术研究中心 上海 201106
基金项目:上海市科技兴农重点攻关项目[农科攻字(99)第1-8号]
摘    要:
从番茄品种强力米寿的总DNA中克隆番茄果实特异启动子2A11,以番茄成熟果实的RNA为模板,进行RT-PCR扩增,克隆番茄全长的ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因片段。完成两个基因的克隆和测序后,将888bp的番茄ACC氧化酶基因和943bp的ACC合成酶基因片段串联,构成全长1837bp的融合基因。将该融合基因以反义的方向插入植物双元载体pYPX145中番茄果实表达特异启动子下游,获得ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因融合的植物双元载体pOSACC。该载体外源基因表达单元的两端含两个烟草SAR序列,利于转基因的稳定遗传。以番茄栽培品种合作903子叶和下胚轴为外植体,利用根癌农杆菌进行基因转化,通过200mg/L卡那霉素选择和GUS检测,获得了105株番茄GUS阳性植株,转基因番茄果实在当代表现明显耐贮特点。经过4代的耐贮和果实农艺性状的综合选择,获得了两个表现良好的株系DR-1和DR-2,两株系果实乙烯释放量显著下降,是未转基因材料的9.5%,番茄的贮存期在50天以上。

关 键 词:ACC氧化酶基因  ACC合成酶基因  反义基因融合  根癌农杆菌  乙烯  番茄
修稿时间:2003-06-30

DOUBLE-ANTISENSE ACC OXIDASE AND ACC SYNTHASE FUSION GENE INTRODUCED INTO TOMATO BY AGROBACTERIUM-MEDIATED TRANSFORMATION AND ANALYSIS THE ETHYLENE PRODUCTION OF TRANSGENIC PLANTS
XIONG Ai Sheng YAO Quan Hong LI Xian FAN Hui Qin PENG Ri He. DOUBLE-ANTISENSE ACC OXIDASE AND ACC SYNTHASE FUSION GENE INTRODUCED INTO TOMATO BY AGROBACTERIUM-MEDIATED TRANSFORMATION AND ANALYSIS THE ETHYLENE PRODUCTION OF TRANSGENIC PLANTS[J]. Journal of Molecular Cell Biology, 2003, 36(6): 428-434
Authors:XIONG Ai Sheng YAO Quan Hong LI Xian FAN Hui Qin PENG Ri He
Abstract:
Keywords:ACC Oxdiase gene. ACC synthase gene. Double-antisense RNA. Agrobacterium tumefa-ciens. Ethylene. Tomato  
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