一个高效表达,快速纯化大肠杆菌精氨酰—tRNA合成酶的 … |
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作者姓名: | 刘文 王恩多 |
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作者单位: | [1]中国科学院上海生物化学研究所,分子生物学国家重点实验室 [2]中国科学院上海生物化学研究所,分子生物学国家重点 |
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摘 要: | 编码大肠杆菌精氨酸-tRNA合成酶的基因argS被克隆到pMFT7-5载体上。将此质粒转化的大肠 力JM109(DE3)中,该转化子粗抽液的比活是宿主菌的2500倍。通过DEAE-Sepharose CL-6B FastFlow和BlueSepharose CL-6B两步柱层析在一天内即可将精氨酰-tRNA合成酶纯化至电泳一条带,比活为36000u/mg,总收率可达69%。
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关 键 词: | 大肠杆菌 精氨酰-tRNA 合成酶 高表达 纯化 |
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