| 口蹄疫病毒3D基因的克隆表达及功能分析 |
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| 引用本文： | 张倩,顾潮江,石立立,李勇,屈三甫,郑从义.口蹄疫病毒3D基因的克隆表达及功能分析[J].中国病毒学,2006,21(4):375-379. |
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| 作者姓名： | 张倩 顾潮江 石立立 李勇 屈三甫 郑从义 |
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| 作者单位： | 张倩（武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072）
顾潮江（武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072）
石立立（武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072）
李勇（武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072）
屈三甫（武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072）
郑从义（武汉大学生命科学学院,病毒学国家重点实验室,湖北,武汉,430072） |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 利用RT-PCR技术扩增了口蹄疫病毒(FMDV)编码RNA依赖的RNA聚合酶的3D基因,并将其克隆到原核表达质粒载体pET-28a(+)中.3D基因经测序确认后在大肠杆菌BL-21中表达,表达产物纯化的目的蛋白进行Western-blotting检测,获得分子量约55KDa的单一3D基因表达产物.利用RNA体外复制体系和荧光定量PCR技术,证明纯化的3D基因表达产物RNA依赖的RNA聚合酶具有较高的酶活性,可以在体外从头合成FMDV RNA,且主要以引物依赖的方式合成病毒基因组.
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| 关 键 词： | 口蹄疫病毒 RNA依赖的RNA聚合酶 体外复制实验 荧光定量PCR |
| 文章编号： | 1003-5125(2006)04-0375-05 |
| 修稿时间： | 2006年1月16日 |
FMDV 3D Gene Cloning Expression and Functional Analysis |
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| ZHANG Qian,GU Chao-jiang,SHI Li-li,LI Yong,QU San-fu,ZHENG Cong-yi.FMDV 3D Gene Cloning Expression and Functional Analysis[J].Virologica Sinica,2006,21(4):375-379. |
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| Authors: | ZHANG Qian GU Chao-jiang SHI Li-li LI Yong QU San-fu ZHENG Cong-yi |
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| Institution: | 1.State Key Laboratory of Virology, College of Life Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Foot-and-mouth disease virus (FMDV) RNA-dependent RNA polymerase Replication system in vitro Strand-specific real-time RT-PCR |
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