| 乙肝病毒X与Tab1蛋白相互作用的体内外验证 |
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| 引用本文： | 于丽丽,胡博,李雪,朱乃硕.乙肝病毒X与Tab1蛋白相互作用的体内外验证[J].中国生物工程杂志,2018,38(7):1-6. |
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| 作者姓名： | 于丽丽 胡博 李雪 朱乃硕 |
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| 作者单位： | 复旦大学生命科学学院 遗传工程国家重点实验室 微生物与分子免疫学实验室 上海 200438 |
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| 基金项目： | 国家科技重大专项(2012ZX10002006-002-003);国家自然科学基金(30571650);国家自然科学基金(31370927);国家863计划(2011AA02A114);上海市科委科学基金(13431900602) |
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| 摘 要： | 目的:借助实验室前期质谱分析技术和数据分析研究基础,采用免疫共沉淀(Co-IP)和蛋白质沉降实验(GST pull-down)验证HBV X蛋白与Tab1蛋白的相互作用,为进一步研究HBx在HBV慢性感染致癌机制中的作用提供一定的实验依据。方法:成功构建pGEX-2TK-GST-HBx质粒,对GST-HBx融合蛋白进行诱导表达,与GST-beads结合孵育,构建pcDNA3.1/myc-His(-)BTab1,转染293T细胞使其表达,然后GST pull-down体外试验验证二者的相互作用;构建pcDNA3.1/myc-His(-)B-Tab1和pcDNA3.1-3×flag-HBx真核表达质粒,共转染293T和HepG2细胞使其表达,通过Co-IP实验验证抗Myc抗体可以将HBx从细胞裂解液中沉淀下来,证实了它们在两种细胞系中存在相互作用。结果:显示了HBx和Tab1在体内外条件下能够发生相互作用,为进一步明确HBV X蛋白功能及作用机制奠定基础。
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| 关 键 词： | HBV X蛋白 Tab1 免疫共沉淀实验 GST沉降实验 相互作用 |
| 收稿时间： | 2018-02-27 |
Identification of Protein-protein Interaction of Hepatitis B Virus X Protein and Tab1 in Vivo and in Vitro |
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| Li-li YU,Bo HU,Xue LI,Nai-shuo ZHU.Identification of Protein-protein Interaction of Hepatitis B Virus X Protein and Tab1 in Vivo and in Vitro[J].China Biotechnology,2018,38(7):1-6. |
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| Authors: | Li-li YU Bo HU Xue LI Nai-shuo ZHU |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HBV X protein Tab1 Co-IP GST pull-down Interaction |
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