| 重组人TNF-α在大肠杆菌表达、纯化及生物学活性鉴定 |
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| 引用本文： | 邓学天,毛海洲,刘丹丹,于淼,于双营,张守涛.重组人TNF-α在大肠杆菌表达、纯化及生物学活性鉴定[J].生物技术,2018(4):335-340. |
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| 作者姓名： | 邓学天 毛海洲 刘丹丹 于淼 于双营 张守涛 |
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| 作者单位： | 郑州大学生命科学学院;解放军第155医院消化内科 |
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| 基金项目： | 国家"重大新药创制"科技重大专项("纤溶/抑制血小板聚集双功能溶栓药物研究"；No.2012ZX09102301) |
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| 摘 要： | 目的]获得人TNF-α蛋白,并鉴定其生物学活性。方法]通过对人源TNF-α序列进行密码子优化构建了p Cold-TNFα原核表达载体,完成了TNF-α重组蛋白的表达,建立了两步分离纯化方案,并利用Western Blot和细胞刺激实验检测了重组人TNF-α蛋白抗原性和生物学活性。结果]利用大肠杆菌成功表达重组人TNF-α蛋白,经酶切纯化后的人TNF-α蛋白不含标签序列,纯度达95%,收率约70%,并具有良好的生物学活性。结论]获得具有生物学活性的人TNF-α蛋白,为进一步的中和抗体研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人肿瘤坏死因子α 原核表达 亲和纯化 |
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