| 枯草芽孢杆菌壳聚糖酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖及其组分分析 |
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| 引用本文： | 程功,焦思明,任立世,冯翠,杜昱光.枯草芽孢杆菌壳聚糖酶水解制备低脱乙酰度壳寡糖及其组分分析[J].中国生物工程杂志,2018,38(9):19-26. |
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| 作者姓名： | 程功 焦思明 任立世 冯翠 杜昱光 |
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| 作者单位： | 中国科学院过程工程研究所 生化工程国家重点实验室 北京 100190 |
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| 基金项目： | * 国家重点研发计划(2016YFB0301502);国家自然科学基金联合基金.(U1608255) |
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| 摘 要： | 对来源于枯草芽孢杆菌菌株168(Bacillus subtilis 168)的壳聚糖酶编码基因进行了序列优化及全合成,并在毕赤酵母(Pichia pastoris)中实现了分泌表达,表达产物的蛋白质浓度达到0.30mg/ml。表达的壳聚糖酶最适p H为5.6,最适温度为55℃,比酶活达84.54U/ml。该酶在50℃及以下较稳定。利用该酶水解低脱乙酰度壳聚糖并使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry,UPLC-QTOF MS)对产物的组分进行了分离及鉴定。根据一级质谱信息,推测酶解产物中包含至少37种聚合度2~18,不同脱乙酰度的壳寡糖组分。综上,利用毕赤酵母分泌表达了来源于枯草芽孢杆菌菌株168的壳聚糖酶基因,利用表达产物水解制备了低脱乙酰度壳寡糖并对其组分进行了分析,可为后续壳寡糖结构与功能关系的研究提供参考。
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| 关 键 词： | 枯草芽孢杆菌 壳聚糖酶 毕赤酵母 壳寡糖 UPLC-QTOF MS |
| 收稿时间： | 2018-05-17 |
Preparation and Composition Analysis of Chitooligosaccharides with Low Degree of Deacetylation by Hydrolysis of Bacillus subtilis Chitosanase |
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| Gong CHENG,Si-ming JIAO,Li-shi REN,Cui FENG,Yu-guang DU.Preparation and Composition Analysis of Chitooligosaccharides with Low Degree of Deacetylation by Hydrolysis of Bacillus subtilis Chitosanase[J].China Biotechnology,2018,38(9):19-26. |
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| Authors: | Gong CHENG Si-ming JIAO Li-shi REN Cui FENG Yu-guang DU |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus subtilis Chitosanase Pichia pastoris Chitooligosaccharides Ultra-performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight mass spectrometry |
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