环氧树脂固定化L-谷氨酸氧化酶 |
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引用本文: | 张利坤,肖延铭,杨卫华,李敬亚.环氧树脂固定化L-谷氨酸氧化酶[J].生物加工过程,2018(4). |
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作者姓名: | 张利坤 肖延铭 杨卫华 李敬亚 |
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作者单位: | 长兴制药股份有限公司工业生物催化与转化浙江省工程研究中心;郑州大学化学与分子工程学院 |
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摘 要: | 通过环氧树脂作为载体对经(NH4)2SO4盐析处理后的L-谷氨酸氧化酶(LGOX)进行固定化,优化固定化工艺条件,并利用固定化LGOX转化产α-酮戊二酸(α-KG)。结果表明:饱和度45%的(NH4)2SO4为最佳盐析浓度;当选用环氧树脂ES-105作为固定化载体、树脂加量为20 m L酶液(14 U/m L)加入3.5 g载体、固定化K3PO4缓冲液浓度为0.2 mol/L(p H 7.0)、固定化温度25℃、固定化时间24 h时,固定化LGOX酶活力最高,其酶活回收率为85.9%,比酶活55.7 U/g。利用该固定化酶转化L-谷氨酸产α-KG,当谷氨酸钠质量浓度为100 g/L,反应20 h,产物收率达98.2%。固定化酶重复使用14批次后,产物收率仍有90%以上;重复使用20批,收率有83.2%。因此,该固定化酶具有具良好的操作稳定性。
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