PCR-微孔板杂交-ELISA法检测巨细胞病毒感染 |
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引用本文: | 严银芳,陈晓,阎远芳,董长恒.PCR-微孔板杂交-ELISA法检测巨细胞病毒感染[J].中国病毒学,2003,18(2):115-118. |
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作者姓名: | 严银芳 陈晓 阎远芳 董长恒 |
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作者单位: | 1. 武汉大学医学院病毒研究所,湖北武汉,430071 2. 武汉市铁路第一中学,湖北武汉,430033 |
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摘 要: | 建立PCR-微孔板杂交-ELISA法检测人血清标本中巨细胞病毒DNA.将5'端标记生物素的PCR扩增产物与5'端标记地高辛的探针呈液相混合,90℃ 2min,55℃,1min杂交.杂交后产物被链霉亲和素酶标板固定,经酶标记抗地高辛标记抗体结合显色.本试剂检测灵敏度为2.5×104 copies/mL,比传统PCR和ELISA敏度性高,特异性强,与单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型,风疹病毒、EB病毒、腺病毒核酸无交叉反应,批内CV为8.9%,批间CV为10.5%.该法可用于定性和定量检测HCMV DNA.
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关 键 词: | 聚合酶链反应 酶联免疫反应 巨细胞病毒 |
文章编号: | 1003-5125(2003)02-0115-04 |
修稿时间: | 2002年9月16日 |
Detection of Human cytomegalovirus Infection by PCR-Hybridization-ELISA |
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