| 人小肠三叶因子在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 王蔚,口如琴,李令媛,茹炳根.人小肠三叶因子在大肠杆菌中的表达[J].中国生物化学与分子生物学报,1999,15(5):724-728. |
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| 作者姓名： | 王蔚 口如琴 李令媛 茹炳根 |
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| 作者单位： | 北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室!北京100871,北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室!北京100871,北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室!北京100871,北京大学生命科学学院 |
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| 摘 要： | 利用PCR技术将人小肠三叶因子(hITF)基因重组入表达载体pGEX-4T-1,构建了融合蛋白GST-hITF的重组表达质粒pGTF,在大肠杆菌中诱导表达。表达的融合蛋白经亲和层析、凝血酶切和凝胶过滤层析得到纯化的hITF蛋白。测定了重组蛋白的氨基酸组成、分子量及其对酸和蛋白酶的抗性。Western印迹表明重组蛋白具有hITF的抗原性,并对大鼠胃溃疡具有明显的预防和保护作用。
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| 关 键 词： | 小肠三叶因子 基因重组 表达 融合蛋白 |
| 收稿时间： | 1999-10-20 |
Expression of Human Intestinal Trefoil Factor in E.coli |
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| WANG Wei,KOU Ruqin,LI Lingyuan,RU Binggen.Expression of Human Intestinal Trefoil Factor in E.coli[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,1999,15(5):724-728. |
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| Authors: | WANG Wei KOU Ruqin LI Lingyuan RU Binggen |
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| Institution: | (Department of Biochemistry and Molecular Biology,College of Life Sciences,Peking University, National Laboratory of Protein Engineering,Beijing 100871 |
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| Abstract: | The cDNA of human intestinal trefoil factor(hITF)was amplified by PCR and cloned into the expression vector pGEX 4T 1,and expressed in E.coli as part of a fusion protein with glutathione S transferase(GST)as the induction of IPTG.Recombinant hITF was purified by affinity chromatography,thrombin digestion and gel filtration.The amino acid composition and molecular mass of purified hITF was determined.hITF was somewhat resistant to acid and proteinase.Western blotting indicated that recombinant protein could react with antibodies against hITF.hITF has precautionary and therapeutic function for hydrochloric acid induced gastric ulcer in rats. |
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| Keywords: | Intestinal trefoil factor Genetic recombination Expression Fusion protein |
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