噬菌体φ297切除酶(xis)基因的克隆和序列分析 |
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引用本文: | 翟静,曹奇志,张媛英,张凤珍.噬菌体φ297切除酶(xis)基因的克隆和序列分析[J].生物技术,2005(2). |
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作者姓名: | 翟静 曹奇志 张媛英 张凤珍 |
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作者单位: | 泰山医学院生物化学教研室 山东泰安271000
(翟静,张媛英),滨州医学院免疫与微生物学教研室 山东滨州256603
(曹奇志),泰山医学院生物化学教研室 山东泰安271000(张凤珍) |
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摘 要: | 目的:克隆噬菌体φ297 切除酶(xis)基因,并对其进行遗传与变异研究。方法:提取埃希氏大肠杆菌O157:H7 菌株EH297染色体DNA,采用步移PCR方法寻找目的基因,并通过克隆、亚克隆、DNA测序等分子生物学方法获得切除酶基因,通过序列分析软件对此基因进行分析。结果:克隆获得噬菌体φ297编码的切除酶基因(xis)的完整序列,它的长度是255 bp,编码了一个84个氨基酸组成的蛋白质(Xis),将它们的序列与λ噬菌体的切除酶家族的其它成员进行了比较。其结果是噬菌体φ297的切除酶基因(xis)与噬菌体VT1-Sakai的切除酶基因(xis)只有4个核苷酸的不同,而Xis蛋白与噬菌体VT1-Sakai的Xis蛋白是一样的,与噬菌体933W的Xis蛋白只有47.2%的相似性。结论:噬菌体φ297编码的切除酶基因(xis)与λ噬菌体的切除酶基因同源。
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关 键 词: | 噬菌体φ297 埃希氏大肠杆菌(EHEC)O157 Shiga毒素(Stx) 切除酶基因(xis) 特殊位点重组 |
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