硫辛酸-香豆素偶联物合成及抗肿瘤活性研究

硫辛酸为一内源性二硫化物,通过线粒体途径抑制多种肿瘤细胞的增殖,而对正常细胞影响甚微;香豆素为一具有荧光的天然产物,广泛应用于生物成像。本实验设计合成了一个新颖的硫辛酸-香豆素偶联物,该偶联物具有多功能。香豆素作为荧光报告器,硫辛酸作为活性药物。当该偶联物进入肿瘤细胞,由于肿瘤细胞中的水解酶把偶联物中的酯键水解,释放出硫辛酸和荧光分子香豆素而发出荧光。采用噻唑兰(MTT)法评价其对肿瘤细胞的增殖抑制活性,活性氧检测试剂盒(DCFH-DA)检测其对活性氧的清除作用,流式细胞术检测其诱导的细胞凋亡及荧光显微检测细胞内成像。实验结果发现该偶联物的细胞毒性相比于母体化合物硫辛酸提高了一个数量级,进一步研究发现该偶联物可清除肿瘤细胞增殖与生长所需的活性氧,同时该偶联物诱导的凋亡显著高于其他组药物。荧光显微镜监测该偶联物在给药6 h后发出的荧光最强,说明该偶联物具有示踪药物水解释放的功能。