| 非洲猪瘟病毒微滴式数字PCR检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 严礼,宋晟,张继红,唐小兰,张海韵,郭焜鹏.非洲猪瘟病毒微滴式数字PCR检测方法的建立与应用[J].激光生物学报,2020,29(4):344-351. |
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| 作者姓名： | 严礼 宋晟 张继红 唐小兰 张海韵 郭焜鹏 |
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| 作者单位： | 食品安全监测与预警湖南省重点实验室,湖南省食品质量监督检验研究院,长沙410117;食品安全监测与预警湖南省重点实验室,湖南省食品质量监督检验研究院,长沙410117;食品安全监测与预警湖南省重点实验室,湖南省食品质量监督检验研究院,长沙410117;食品安全监测与预警湖南省重点实验室,湖南省食品质量监督检验研究院,长沙410117;食品安全监测与预警湖南省重点实验室,湖南省食品质量监督检验研究院,长沙410117;食品安全监测与预警湖南省重点实验室,湖南省食品质量监督检验研究院,长沙410117 |
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| 基金项目： | 国家市场监督管理总局技术保障专项项目;湖南省科技创新平台与人才计划项目 |
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| 摘 要： | 为建立一种特异性强、灵敏度高、重复性好的非洲猪瘟病毒微滴数字PCR检测方法,本研究根据非洲猪瘟病毒核酸的2段保守序列(VP72和K205基因)设计合成了3对引物和探针,摸索其反应条件,优化方法,比较方法的线性、特异性、灵敏性和重复性。结果发现,这3对引物和探针的非洲猪瘟病毒方法检出限均小于6拷贝数/反应,在10～106拷贝数/反应之间均呈良好的线性关系,定量范围内的检测变异系数均低于15%,且不与猪常见的2种病毒发生交叉反应,适用于猪肉及其制品中非洲猪瘟病毒的检测,有利于在源头、食品加工、食品销售等各个环节加强对生鲜猪肉及各类猪肉制品中非洲猪瘟病毒的检测,切实降低潜在风险。
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟 病毒 微滴数字PCR 实时荧光定量PCR |
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