| 影响小鼠体细胞脂质体法转染效率的因素 |
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| 引用本文： | 于建宁,苗德强,马所峰,谭秀文,袁继红,谭景和.影响小鼠体细胞脂质体法转染效率的因素[J].分子细胞生物学报,2005,38(5):404-410. |
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| 作者姓名： | 于建宁 苗德强 马所峰 谭秀文 袁继红 谭景和 |
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| 作者单位： | 山东农业大学动物科技学院，山东农业大学动物科技学院，山东农业大学动物科技学院，山东农业大学动物科技学院，山东农业大学动物科技学院，山东农业大学动物科技学院 山东泰安 271018，山东泰安 271018，山东泰安 271018，山东泰安 271018，山东泰安 271018，山东泰安 271018 |
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| 基金项目： | 国家科技部“973”项目（编号G200016107）
国家自然基金（No．30430530）~~ |
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| 摘 要： | 本实验主要研究脂质体量、质粒量、细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间、细胞传代次数以及细胞种类对转基因效率的影响。首先研究了脂质体量、质粒量和细胞在脂质体-质粒复合物中暴露时间对小鼠胎儿成纤维细胞(MFFC)的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响。结果表明,在本实验条件下,用传至3代的MFFC,24孔培养板中每孔接种4-10×10~4个细胞,70%-90%贴满程度,当脂质体(LipofectAMINE)4μg、质粒(pEGFP-N1)0.3μg,复合物作用时间为6h时获得的转染效率最高, 为30.7%。用此方案比较不同传代次数的MFFC转染效率结果表明,原代细胞的转染效率为10.0%, 3代为28.9%,到15代降到7.2%。说明随着传代次数的增加,转染效率逐渐降低。将MFFC、小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和小鼠颗粒细胞(MGC)分别传至3代,采用上述方案进行转染,转染效率分别是27.8%、13.7%和14.2%。可见不同种类细胞的转染效率不同。细胞周期检测表明,无论是不同代次的细胞还是不同种类的细胞,其转染效率高低与M期所占比例的多少有关。这为如何提高转染效率提供了有利的依据。
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| 关 键 词： | 基因转移 脂质体 小鼠体细胞 传代次数 细胞周期 |
| 修稿时间： | 2005年1月31日 |
FACTORS AFFECTING LIPOSOME-MEDIATED GENE TRANSFECTION OF MOUSE SOMATIC CELLS |
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| YU Jian Ning,MIAO De Qiang,MA Suo Feng,TAN Xiu Wen,YUAN Ji Hong,TAN Jing He College of Animal Science and Technology,Shandong Agriculture University,Taian.FACTORS AFFECTING LIPOSOME-MEDIATED GENE TRANSFECTION OF MOUSE SOMATIC CELLS[J].Journal of Molecular Cell Biology,2005,38(5):404-410. |
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| Authors: | YU Jian Ning MIAO De Qiang MA Suo Feng TAN Xiu Wen YUAN Ji Hong TAN Jing He College of Animal Science and Technology Shandong Agriculture University Taian |
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| Institution: | YU Jian Ning,MIAO De Qiang,MA Suo Feng,TAN Xiu Wen,YUAN Ji Hong,TAN Jing He College of Animal Science and Technology,Shandong Agriculture University,Taian 271018 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gene transfection Liposome Mouse somatic cells Passage number Cell cycle stages |
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