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D-乳酸脱氢酶基因克隆及其表达
引用本文:李剑 唐贇 梁凤来 马建芳 刘如林. D-乳酸脱氢酶基因克隆及其表达[J]. 微生物学报, 2004, 44(4): 491-495
作者姓名:李剑 唐贇 梁凤来 马建芳 刘如林
作者单位:1. 南开大学生命科学学院,天津,300071
2. 天津南开戈德集团,天津,300071
摘    要:构建了一株产D ,L 乳酸的乳杆菌 (Lactobacillussp .)MD 1的基因文库。利用乳酸脱氢酶和丙酮酸裂解酶缺陷的EscherichiacoliFMJ1 4 4作为宿主 ,在厌氧条件下通过互补筛选获得乳酸脱氢酶基因 (ldh) ,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (Native PAGE)检测证明其阳性克隆表现出D 乳酸脱氢酶 (D LDH)活性。核酸序列分析表明 ,ldhD的ORF编码 331个氨基酸残基组成的蛋白质有两个保守区域 ,其中V1 47~D1 76 区是NADH的结合位点 ,R77~E1 0 7区据报道是酶的活性部位。该菌株D LDH和D羟基异己酸脱氢酶 (D HicDH)属于NADH依赖性脱氢酶家族 ,ldhD和其他乳杆菌属的ldhD及D HicDH基因和编码的氨基酸序列相似性较低 ,核酸序列相似性最高达 4 9 33% ,氨基酸序列相同性最高为 4 2 % ,是一个新的D 乳酸脱氢酶基因

关 键 词:乳杆菌MD-1  D-乳酸脱氢酶  基因克隆  表达
文章编号:0001-6209(2004)04-0491-05
修稿时间:2003-12-09

Cloning and Expression of D-Lactate Dehydrogenase Gene in Lactobacillus sp.MD-1
LI Jian TANG Yun LIANG Feng Lai MA Jian Fang LIU Ru Lin. Cloning and Expression of D-Lactate Dehydrogenase Gene in Lactobacillus sp.MD-1[J]. Acta microbiologica Sinica, 2004, 44(4): 491-495
Authors:LI Jian TANG Yun LIANG Feng Lai MA Jian Fang LIU Ru Lin
Affiliation:LI Jian 1 TANG Yun 1 LIANG Feng Lai 1 MA Jian Fang 2 LIU Ru Lin 1*
Abstract:
Keywords:Lactobacillus sp. MD 1   D lactate dehydrogenase   Cloning   Expression
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