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α-Synuclein与14-3-3蛋白在体外分子间相互作用的鉴定
引用本文:黄银霞,韩俊,韩露,董辰方,高晨,王小凡,周伟,董小平.α-Synuclein与14-3-3蛋白在体外分子间相互作用的鉴定[J].中国生物化学与分子生物学报,2007,23(6):469-473.
作者姓名:黄银霞  韩俊  韩露  董辰方  高晨  王小凡  周伟  董小平
作者单位:中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,传染病预防控制国家重点实验室,北京,100052
基金项目:国家自然科学基金;国家科技攻关计划;欧盟资助项目
摘    要:帕金森病(Parkinson’s disease, PD)涉及两种蛋白——α-synuclein蛋白(SNCP)与14-3-3蛋白.通过重组,将这两种蛋白在大肠杆菌DH5α中表达, 通过谷胱甘肽- Sepharose 4B亲和层析将其纯化,得到GST-14-3-3蛋白;利用凝血酶对纯化的融合蛋白GST-SNCP切割,再经谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析获得SNCP.通过免疫共沉淀、GST pull down和ELISA等技术,证明SNCP能够与14-3-3蛋白结合;为了进一步证明SNCP也与在脑组织中的天然14-3-3蛋白发生作用,利用His pull down方法进行实验.结果证明,SNCP能够和脑组织中的14-3-3蛋白发生相互作用.这些结果从分子水平提供了SNCP与14-3-3蛋白相互作用的实验证据,为进一步了解SNCP的结构和功能,及其在中枢神经系统退行性疾病的作用提供了必要的实验基础.

关 键 词:退行性疾病  免疫共沉淀  pulldown  蛋白相互作用  α-synuclein  14-3-3蛋白  
收稿时间:2006-11-10
修稿时间:2006年11月10
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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