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| CRISPR/Cas9编辑绒山羊FGF5基因细胞株的建立 | |
| 作者姓名： | 阿力玛 高原 苏小虎 周欢敏 |
| 作者单位： | 内蒙古农业大学生命科学学院 内蒙古自治区生物制造重点实验室 呼和浩特 010018 |
| 基金项目： | “转基因生物新品种培育”国家科技重大专项资助项目（2014ZX08008-002） |
| 摘 要： | 拟利用CRISPR/Cas9技术建立编辑FGF5基因的绒山羊细胞株。在FGF5基因的第一外显子设计靶点并合成gRNA靶点引物,构建2个编辑FGF5基因的Cas/gRNA真核表达质粒载体。电穿孔法转染绒山羊成纤维细胞后T7核酸内切酶（T7E1）检测载体活性,选择活性最高的载体转染细胞,单细胞接种并扩繁,提取基因组DNA,PCR及测序鉴定。经测序分析共获得20个FGF5基因敲除细胞株（包括FGF5+/-和FGF5-/-）,总突变率为14.81%。双敲除突变细胞株可作为供体细胞进行重构胚构建,为创造高产绒性状的FGF5基因编辑绒山羊奠定基础。 |
| 关 键 词： | 基因编辑 FGF5 CRISPR/Cas9 绒山羊 |
| 收稿时间： | 2016-01-07 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |
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