应用电击法获得转MT基因平菇

将MT基因用电击法转化平菇(Pleurotus ostreatus),MT基因表达蛋白与金属离子结合而形成络合物,用Zn 诱导,转基因平菇能富集Zn,可为缺Zn的人群补充Zn,使平菇成为一种保健和治疗的食品或蔬菜.原生质体制备浓度为6.745×106个/mL.原生质体电击转化率为0.01%.PCR检测,200 bp处有MT基因条带.蛋白检测:转基因MT平菇ELISA检测阳性,表达率为0.6%～0.8%.SDS-PAGE 显示有表达条带.Western blot显示有阳性条带.抗ZnSO4结果:野生型平菇抗ZnSO4浓度为1.0 mmol/L,1.2 mmol/L开始受抑制,转基因平菇抗ZnSO4浓度为1.5 mmol/L, 2.0 mmol/L开始受抑制. 出菇试验结果表明,在米糠与锯沫比为1∶3的培养基上生长,在米糠与锯沫比为1∶4的培养基上不生长.24 d菌丝可在广口瓶中长满,用于子实体培养.

Transformation of Metallothionein Gene into Mushroom Protoplasts by Application of Electroporation