| 番茄(Solanum lycopersicum)果胶酸裂解酶P56在大肠杆菌中的重组表达 |
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| 引用本文： | 赵庆新,王鑫,张宇玲,袁生. 番茄(Solanum lycopersicum)果胶酸裂解酶P56在大肠杆菌中的重组表达[J]. 武汉植物学研究, 2007, 25(6): 539-543 |
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| 作者姓名： | 赵庆新 王鑫 张宇玲 袁生 |
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| 作者单位： | 1. 南京师范大学生命科学学院微生物工程重点实验室,南京,210046;盐城师范学院生命科学与技术学院,江苏盐城,224002
2. 南京师范大学生命科学学院微生物工程重点实验室,南京,210046 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;江苏省自然科学基金;江苏省教育厅高校自然科学基金 |
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| 摘 要： | 果胶酸裂解酶P56在番茄花粉管伸长过程中起着重要的作用,为了制备番茄P56蛋白的抗体,进行番茄花粉管萌发过程中P56蛋白的免疫组织化学研究,对P56基因在大肠杆菌系统的重组表达进行了研究。先采用Overlap-PCR的方法,从番茄基因组DNA中克隆了成熟P56蛋白的cDNA序列(LAT56),再构建重组表达质粒pET28a( )-LAT56,转化大肠杆菌BL21-CodenPlus(DE3)-RIL,得到了重组表达工程菌pET-28a( )-LAT56-BL21-Co-denPlus(DE3)-RIL。在0.5 mmol/L IPTG、15℃和180 r/min条件下,经过60 h的诱导培养,重组蛋白表达量为细胞总蛋白的30%左右,主要以包涵体形式存在,重组蛋白经Ni2 -nitrilotriacetate-agrose亲和柱层析,得到了SDS-PAGE显示为单一蛋白带的纯化蛋白。
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| 关 键 词： | 番茄 果胶酸裂解酶(P56) 大肠杆菌 表达 |
| 文章编号： | 1000-470X（2007）06-0539-05 |
| 收稿时间： | 2007-04-11 |
| 修稿时间： | 2007-07-27 |
Expression of P56 Pectate Lyase from Solanum lycopersicum in Escherichia coli |
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| ZHAO Qing-Xin,WANG Xin,ZHANG Yu-Ling,YUAN Sheng. Expression of P56 Pectate Lyase from Solanum lycopersicum in Escherichia coli[J]. Journal of Wuhan Botanical Research, 2007, 25(6): 539-543 |
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| Authors: | ZHAO Qing-Xin WANG Xin ZHANG Yu-Ling YUAN Sheng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Solanum lycopersicum Pectate lyase(P56) Escherichia coli Expression |
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