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| 转基因水稻中转录水平crylAb基因的沉默及其阶段复活 | |
| 引用本文： | 吴刚,崔海瑞,舒庆尧,叶恭银,夏英武,高明尉,I.Altosaar,李毅.转基因水稻中转录水平crylAb基因的沉默及其阶段复活[J].中国科学C辑,2001,31(6). |
| 作者姓名： | 吴刚 崔海瑞 舒庆尧 叶恭银 夏英武 高明尉 I.Altosaar 李毅 |
| 作者单位： | 1. 浙江大学原子核农业科学研究所,杭州,310029;北京大学蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室,北大-耶鲁植物分子遗传学与农业生物技术联合中心,北京,100871 2. 浙江大学原子核农业科学研究所,杭州,310029 3. 浙江大学植物保护系,杭州,310029 4. Department of Biochemistry,Microbiology andImmunology,University of Ottawa,K1N 6N5.Canada 5. 北京大学蛋白质工程与植物基因工程国家重点实验室,北大-耶鲁植物分子遗传学与农业生物技术联合中心,北京,100871 |
| 基金项目： | 美国洛克菲勒兄弟基金会资助项目，教育部霍英东教育基金会高等院校青年教师基金 |
| 摘 要： | 以田间环境释放条件下农杆菌介导法转化而成的转crylAb基因水稻为研究对象,利用GUS组织化学染色法、Western杂交技术,在不抗虫转基因中8215株系后代中筛选到一个无Cry1Ab蛋白表达产物株系.分子杂交结果证实,转基因crylAb在中8215株系后代中发生了转录水平沉默,整合过程中基因重排使两个拷贝的ubiquitin启动子同时插入到水稻基因组中.甲基化分析证实ubiquitin启动子区域发生了甲基化,从而导致crylAb基因沉默.利用去甲基化试剂5-氮胞苷处理转基因沉默水稻种子,并在苗期、分蘖期、孕穗期、灌浆期及成熟期检测了其对沉默基因的复活效应,结果表明:5-氮胞苷处理使沉默的crylAb基因在灌浆期恢复表达活性,复活率约为8%～30%,且以低浓度(45 mg/L处理1,2 d)处理的复活率及恢复表达水平较高,复活基因表达的Cry1Ab蛋白最高可达可溶性总蛋白的0.147%. |
| 关 键 词： | 转基因水稻 crylAb基因 沉默 复活 |
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