在甲醇酵母Pichia pastoris胞内表达有活性的辣根过氧化物酶 |
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作者姓名: | 蒋太交 吉鑫松 章如安 袁中一 |
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作者单位: | 中国科学院上海生物化学研究所!上海200031,中国科学院上海生物化学研究所!上海200031,中国科学院上海生物化学研究所!上海200031,中国科学院上海生物化学研究所!上海200031 |
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摘 要: | 为了开辟在甲醇酵母 Pichia pastoris中表达 HRP的新途径 ,将编码成熟 HRP同功酶 C基因克隆到表达载体 p PIK3.5K中 .p PIK3.5KHRP转化 GS1 1 5后 ,用 PCR筛选阳性 P.pastoris重组株 ,并用甲醇进行诱导 . Western印迹杂交分析表明目标蛋白 (约为 38k D)能被天然 HRP的多克隆抗体所识别 ,因此活性辣根过氧化物酶已在 P.pastoris胞内表达 .筛选菌株中显示了明显的过氧化物酶活性 ,同时诱导过程中血红素和 Ca Cl2 的加入对过氧化物酶的活力影响不大
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关 键 词: | 辣根过氧化物酶 毕赤酵母 基因表达 |
收稿时间: | 2000-04-20 |
修稿时间: | 1999-06-11 |
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