| 用λZAP Express作载体构建金针菇子实体表达型cDNA文库 |
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| 引用本文： | 周凯松,常宁,彭俊峰,张晗星,张长铠. 用λZAP Express作载体构建金针菇子实体表达型cDNA文库[J]. 菌物学报, 2003, 22(1): 101-106 |
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| 作者姓名： | 周凯松 常宁 彭俊峰 张晗星 张长铠 |
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| 作者单位： | 山东大学微生物技术国家重点实验室,济南,250100;山东大学微生物技术国家重点实验室,济南,250100;山东大学微生物技术国家重点实验室,济南,250100;山东大学微生物技术国家重点实验室,济南,250100;山东大学微生物技术国家重点实验室,济南,250100 |
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| 基金项目： | 教育部博士点基金(No. 2000042212)资助 |
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| 摘 要： | 采用QuickPrep micro mRNA Purification 试剂盒从新鲜金针菇子实体中快速提取、纯化mRNA,Time Saver cDNA Synthesis试剂盒逆转录成cDNA分子后,通过在cDNA分子两端加上EcoRⅠ/NotⅠ接头,在T4多核苷酸激酶的作用下磷酸化,与表达载体λZAP Express Predigested Vector连接,然后用包装蛋白在体外包装连接产物,感染E.coli XL1-Blue MRF'构建成表达cDNA文库.经检测文库滴度为4.0×106 pfu/ml,文库扩增后,滴度达2.0×1010 pfu/ml,重组率为90%,cDNA分子长度在0.3-3.5 Kb范围.应用原位免疫杂交,初步筛选出火菇素相关基因的阳性克隆.
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| 关 键 词： | 滴度 重组率 免疫筛选 |
| 文章编号： | 1007-3515(2003)01-0101-0106 |
| 修稿时间： | 2002-08-26 |
CONSTRUCTION OF CDNA EXPRESSION LIBRARY OF FLAMMULINA VELUTIPES |
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| ZHOU Kai-Song CHANG Ning PENG Jun-Feng ZHANG Han-Xing ZHANG Chang-Kai. CONSTRUCTION OF CDNA EXPRESSION LIBRARY OF FLAMMULINA VELUTIPES[J]. Mycosystema, 2003, 22(1): 101-106 |
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| Authors: | ZHOU Kai-Song CHANG Ning PENG Jun-Feng ZHANG Han-Xing ZHANG Chang-Kai |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tilter recombinant rate western blotting |
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