草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达 |
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引用本文: | 叶星,白俊杰,简清,李新辉,李英华,李凯彬,罗建仁.草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达[J].中国生物化学与分子生物学报,2001,17(6):725-728. |
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作者姓名: | 叶星 白俊杰 简清 李新辉 李英华 李凯彬 罗建仁 |
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作者单位: | 中国水产科学研究院珠江水产研究所, |
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基金项目: | 农业部“九五”重点渔业科技资助项目(渔95-B-96020802) |
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摘 要: | 为构建草鱼 (Ctenopharyngodonidellus )胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )大肠杆菌表达质粒 ,对已克隆到的草鱼IGF Ⅰ基因进行改造 .改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列 ,并在基因的两端分别加入起始密码子和终止密码子 .将改造后的编码草鱼IGF Ⅰ成熟肽基因亚克隆到pBV 2 2 0中 ,构建成表达质粒pBVgIGF7.转化大肠杆菌 (Escherichiacoli)进行表达 .SDS PAGE显示 ,含重组表达质粒的菌株经热诱导后表达出一约 7 5kD的特异蛋白 .表达量占菌体总蛋白的2 0 0 3% ,表达产物主要以包涵体形式存在 .重组蛋白经纯化和复性后 ,采用MTT法测定其对草鱼吻端成纤维细胞PSF和草鱼卵巢细胞CO的促增殖作用 .结果表明 ,所获得的重组草鱼IGF Ⅰ具有生物活性
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关 键 词: | 草鱼 胰岛素样生长因子-Ⅰ 大肠杆菌表达 生物活性 |
收稿时间: | 2001-12-20 |
修稿时间: | 2001年1月15日 |
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