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单胚RT-PCR:基因表达动态研究及应用技术探讨
作者姓名:邹建伟  孙蒙祥  杨弘远
作者单位:邹建伟 (武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室,武汉,430072) ; 孙蒙祥 (武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室,武汉,430072) ; 杨弘远 (武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室,武汉,430072) ;
基金项目:国家自然科学基金,国家自然科学基金,国家重点基础研究发展计划(973计划)
摘    要:为进一步探讨单胚RT-PCR技术的适用性,我们测试了3个特定的基因STM、MP和ASKη在拟南芥(Arabidopsisthaliana(L.)Heynh.)早期胚胎发生过程中的动态表达情况.进一步证实以该技术研究某些特定基因的表达动态是可行的.着重探讨了扩增产量与模板量的对应关系、基因组DNA的干扰以及DNase Ⅰ处理过程中的mRNA降解等主要技术问题.结果表明:材料制备时显微操作技术的稳定是确保单胚RT-PCR结果稳定的关键.应尽量缩短DNaseⅠ处理时间,以避免mRNA降解.

关 键 词:单胚RT-PCR  基因表达模式  胚胎发生  拟南芥
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