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玉米联合固氮菌Kosakonia radicincitans GXGL-4A的分离鉴定与固氮特性研究
引用本文:李琼洁,程杰杰,孙帅欣,陈云鹏.玉米联合固氮菌Kosakonia radicincitans GXGL-4A的分离鉴定与固氮特性研究[J].微生物学通报,2016,43(11):2456-2463.
作者姓名:李琼洁  程杰杰  孙帅欣  陈云鹏
作者单位:上海交通大学农业与生物学院 农业部都市农业(南方)重点实验室 上海 200240,上海交通大学农业与生物学院 农业部都市农业(南方)重点实验室 上海 200240,上海交通大学农业与生物学院 农业部都市农业(南方)重点实验室 上海 200240,上海交通大学农业与生物学院 农业部都市农业(南方)重点实验室 上海 200240
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目(973计划)(No. 2015CB755702)
摘    要:【目的】固氮微生物是生物固氮的主体,其菌种的选育更是生物固氮研究的基础。本实验室分离鉴定出一株新的固氮菌,并对其固氮相关活性进行初步研究。【方法】固氮菌采用Ashby无氮培养基进行分离纯化。通过形态特征分析、生理生化特征分析、16S r RNA基因序列分析和基因组扫描对固氮菌进行鉴定。利用靛酚蓝-分光光度法检测固氮菌的泌铵能力。固氮酶活性的测定使用乙炔还原法。【结果】从玉米根部分离到一株固氮菌株GXGL-4A,菌体短杆状,大小约为1.5μm×0.5μm,单个或常见2个菌体细胞串联在一起,革兰氏染色结果为阴性。16S r RNA基因序列分析结果表明该菌株与Kosakonia oryzae Fo8A1d 16S r RNA基因序列有95%的相似性,结合形态特征、生理生化特征和基因组扫描,将其命名为K.radicincitans GXGL-4A。对其进行固氮基因nif H的检测,经PCR扩增得到预期的296 bp条带;采用靛酚蓝-分光光度法,测得发酵液中铵态氮含量为2.5 mg/L,表明该菌株具有较好的泌铵能力。乙炔还原法测其固氮酶活性,以乙烯生产量表示,结果显示GXGL-4A菌株在无氮培养基上能够有效地还原乙炔,达到232.94 nmol C2H4/(m L·h)。【结论】菌株GXGL-4A是一株可较好地分泌铵的新的固氮菌,具有很好的研究价值。

关 键 词:玉米,固氮菌,分离鉴定,Kosakonia  radicincitans  GXGL-4A

Isolation, identification and characterization of associative nitrogen-fixing endophytic bacterium Kosakonia radicincitans GXGL-4A in maize
LI Qiong-Jie,CHENG Jie-Jie,SUN Shuai-Xin and CHEN Yun-Peng.Isolation, identification and characterization of associative nitrogen-fixing endophytic bacterium Kosakonia radicincitans GXGL-4A in maize[J].Microbiology,2016,43(11):2456-2463.
Authors:LI Qiong-Jie  CHENG Jie-Jie  SUN Shuai-Xin and CHEN Yun-Peng
Institution:School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Key Laboratory of Urban Agriculture (South), Ministry of Agriculture, Shanghai 200240, China,School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Key Laboratory of Urban Agriculture (South), Ministry of Agriculture, Shanghai 200240, China,School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Key Laboratory of Urban Agriculture (South), Ministry of Agriculture, Shanghai 200240, China and School of Agriculture and Biology, Shanghai Jiao Tong University, Key Laboratory of Urban Agriculture (South), Ministry of Agriculture, Shanghai 200240, China
Abstract:
Keywords:Maize  Nitrogen-fixing bacterium  Isolation and identification  Kosakonia radicincitans GXGL-4A
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