人干细胞因子受体c-Kit稳定表达细胞株的构建 |
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作者姓名: | 熊安琪 陈松森 狄旭 刘长征 姚杰 |
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作者单位: | 中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院!北京100005,中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院!北京100005,中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院!北京100005,中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础 |
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基金项目: | 国家"九五"攻关项目资助(No.96-CO2-01-10-1) |
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摘 要: | 干细胞因子 (SCF)是一种重要的造血因子 ,其受体c Kit具有酪氨酸激酶活性 .SCF c Kit介导的细胞内信号转导在造血、肥大细胞的生成及其功能、以及生殖细胞和黑色素细胞的发育中起着关键的作用 .通过构建人c kitcDNA的pcDNA3.1真核表达载体 ,转染不表达人c kit的小鼠髓系祖细胞FDC P1.经Zeocin抗性筛选 ,PCR、RT PCR、Western印迹分析、流式细胞仪分析等方法检测到人c kit基因的稳定整合和表达 ,并分布于细胞表面 ,证明获得了稳定表达人c Kit受体的细胞株 .用MTT法检测重组细胞株增殖特性 ,表明重组人SCF可刺激其增殖 .为进一步研究人c Kit受体介导的细胞内信号转导及检测重组人干细胞因子生物学活性提供了有效的细胞模型
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关 键 词: | 人干细胞因子受体c-Kit 转染 FDC-P1细胞株 表达 增殖 |
收稿时间: | 2001-08-20 |
修稿时间: | 2000-11-03 |
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