牛生长激素cDNA的分子克隆

我们克隆了与牛生长激素Poly(A)⁺RNA互补的DNA(cDNA)。首先从小牛垂体中提纯总的Pply(A)⁺RNA，用AMV逆转录酶合成单链cDNA，以单链cDNA为模板合成双链cDNA，用多聚G及多聚c谱尾法将双链cDNA克隆到pBR322质粒的Pst I位点上，构建成牛垂体PoIy(A)⁺RNA的cDNA文库。以牛生长激素基因为探针，筛选出7个阳性菌落，经电泳鉴定有两个菌落(1号和2号)含有大于500bp的插入片段。1号克隆经酶切图谱、southeTn blot 杂交及序列分析证实含有牛生长激素的编码序列。