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Baff转基因斑马鱼的构建及相关基因表达检测
作者单位:;1.河北医科大学实验动物学部;2.河北省实验动物实验室;3.河北医科大学第三医院检验科
摘    要:通过RT-PCR法由斑马鱼脾脏克隆B细胞刺激因子baff基因,构建过表达斑马鱼baff且携带有绿色荧光标记蛋白的重组质粒pIRES2-GFP-baff;胚胎显微注射获得转基因斑马鱼胚胎;通过GFP荧光标记跟踪并筛选转基因阳性鱼;Western blot法鉴定Baff-GFP融合蛋白表达情况;qPCR检测baff,GFP及baff下游相关基因bcl-2,il-4mR-NA表达情况。结果表明细胞、胚胎及幼鱼baff和GFP均高表达,baff下游基因bcl-2激活和il-4基因抑制表达。通过胚胎显微注射法可成功获得过表达baff的转基因斑马鱼,此研究为建立红斑狼疮转基因斑马鱼模型及高通量筛选Baff拮抗剂奠定了基础。

关 键 词:斑马鱼  红斑狼疮  baff  bcl-2  il-4

The Construction of Transgenic Zebrafish Overexpressing Baff and the Detection of baff-related Genes Expression
Abstract:
Keywords:
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