| 大肠杆菌亮氨酰－tRNA合成酶LeuRS67R的纯化及其动力学研究 |
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| 引用本文： | 李彤,夏宪,王恩多,王应睐. 大肠杆菌亮氨酰－tRNA合成酶LeuRS67R的纯化及其动力学研究[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 1995, 0(3) |
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| 作者姓名： | 李彤 夏宪 王恩多 王应睐 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室 |
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| 摘 要： | 本实验室已得到的亮氨酰－ｔＲＮＡ合成酶（ＬｅｕＲＳ）基因，与文献相比，６７位氨基酸残基由Ｈｉｓ变为Ａｒｇ，此酶被定名为ＬｅｕＲＳ６７Ｒ。我们从该基因与ｐＵＣ１９重组质粒的大肠杆菌ＴＧ１转化子ＴＧ１－９１中得到ＬｅｕＲＳ的高表达，粗抽液中ＬｅｕＲＳ的表达量在转化子中比在宿主菌ＴＧ１中高２０倍以上。用三步拉层析得到电泳一条带的酶，其比活为１７８９单位／毫克。测定其动力学常数，氨酰化活力对Ｌｅｕ、ＡＴＰ的Ｋｍ值分别为０．０２７ｍｍｏｌ／Ｌ、０．４７ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｋｃａｔ值分别为３．５～５．１ｓ－１。ＡＴＰ－ＰＰｉ交换活力对Ｌｅｕ、ＡＴＰ的Ｋｍ值分别为０．０３ｍｍｏｌ／Ｌ、１．０ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｌｃａｔ值分别为１４０～１５５ｓ－１。此结果与从野生型大肠杆菌Ｋ－１２中提纯的ＬｅｕＲＳ的动力学常数差别很小，６７位氨基酸残基在与活性中心无直接关系的域可能是大肠杆菌的种间差异。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌，动力学常数，亮氨酰－tRNA合成酶 |
^The Purification and Studies of Kinetics of E. coli Leucyl-tRNA Synthetase Mutant (LeuRS67R) |
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| LI Tong, XIA Xian, WANG En-Duo and WANG Ying-Lai. ^The Purification and Studies of Kinetics of E. coli Leucyl-tRNA Synthetase Mutant (LeuRS67R)[J]. Acta biochimica et biophysica Sinica, 1995, 0(3) |
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| Authors: | LI Tong XIA Xian WANG En-Duo WANG Ying-Lai |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | E. coli Kinetic constants Leucyl-tRNA Bynthetase |
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