| 利用分子环化技术提高瘤胃微生物木聚糖酶热稳定性 |
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| 作者姓名： | 周可鑫 王欢 朱鑫涛 郑安琪 李锘 孙小宝 高德英 安培培 王佳堃 钱国英 王谦 |
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| 作者单位： | 1 浙江万里学院 生物与环境学院,浙江 宁波 315100;1 浙江万里学院 生物与环境学院,浙江 宁波 315100;2 浙江大学 动物科学学院,浙江 杭州 310012 |
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| 基金项目： | 国家级大学生创新创业训练计划 (No. 201810876022),浙江省大学生新苗人才计划 (No. 2018R420012),浙江省自然科学基金 (No. LQ19C050001),浙江省生物工程一流学科自设课题 (No. ZS2017010) 资助。 |
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| 摘 要： | 在高温下保持催化活性是工业酶的重要性质。近年来,采用基因工程、蛋白质工程技术提高野生酶进行催化活性或耐热等性质取得了重要进展。文中利用新近建立起来的异肽键介导的SpyTag/SpyCatcher系统对瘤胃微生物来源的木聚糖酶XYN11-6进行分子环化,获得稳定的环化酶C-XYN11-6。在60℃、70℃和80℃下处理10 min,C-XYN11-6的残余活性为81.53%、73.98%和64.41%,分别是相同条件下线性蛋白L-XYN11-6残余活性的1.48、2.92、3.98倍。经60–90℃热处理10 min后,C-XYN11-6仍保持可溶状态,而L-XYN11-6几乎完全聚沉。内源荧光和8-苯胺-1-萘磺酸(8-anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS)结合荧光光谱分析显示,较之L-XYN11-6,热处理环境中C-XYN11-6更能够维持其构象稳定。值得注意的是,分子环化提高了C-XYN11-6对0.1–50 mmol/L Ca2+或0.1 mmol/L Cu2+的耐受能力。综上所述,文中利用Spy...
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| 关 键 词： | 瘤胃 木聚糖酶 分子环化 底物降解 热稳定性 |
| 收稿时间： | 2019-07-29 |
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