苦瓜果实β-半乳糖苷酶基因的克隆、表达及亚细胞定位 |
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引用本文: | 高山,陈桂信,许端祥,林碧英,林义章,潘东明.苦瓜果实β-半乳糖苷酶基因的克隆、表达及亚细胞定位[J].植物遗传资源学报,2013,14(6):1124-1129. |
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作者姓名: | 高山 陈桂信 许端祥 林碧英 林义章 潘东明 |
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作者单位: | 福建省福州市蔬菜科学研究所 |
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摘 要: | 根据已构建苦瓜果实均一化文库中获得的1个与β-Gal基因相关的EST序列,采用经3’RACE技术,克隆获得1 个苦瓜β-Gal基因的cDNA 序列McGAL,全长为2261bp,开放阅读框2187bp,编码719个氨基酸。该基因在GenBank 基因数据库的登录号为AFD54987.1。应用生物信息学软件对McGAL氨基酸序列分析表明,McGAL含有糖苷水解酶家族35的保守结构域G-G-P-LIVM]-x-Q-x-E-N-E-FY],C端不含凝集素结构域。二级结构显示,该酶含有α-螺旋(19.89%),伸展链(26.98%),β-转角(6.54%)和无规卷曲(46.59%)。McGAL氨基酸序列与鹰嘴豆、苜蓿、绿豆、大豆、羽扇豆的氨基酸序列的同源性分别达到73%、73%、73%、72%和71%。亚细胞定位结果表明,McGAL定位在线粒体膜上。荧光定量结果表明,McGAL在果实绿熟期表达量最高并随之下降,该基因可能与果实成熟软化初期相关。
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关 键 词: | 苦瓜 β-半乳糖苷酶 亚细胞定位 实时荧光定量PCR |
收稿时间: | 2013/3/17 0:00:00 |
修稿时间: | 5/7/2013 12:00:00 AM |
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