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红花脂质转运蛋白基因的克隆及表达分析北大核心CSCD
引用本文:韩怡来,崔琪,武云云,顾天瑶,滕孝花,胡人阁,吴贯达,官丽莉,李海燕,李校堃.红花脂质转运蛋白基因的克隆及表达分析北大核心CSCD[J].生物技术通报,2016(7):146-151.
作者姓名:韩怡来  崔琪  武云云  顾天瑶  滕孝花  胡人阁  吴贯达  官丽莉  李海燕  李校堃
作者单位:1.吉林农业大学生命科学学院130118;2.通化市第一中学134000;3.吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心130118;
基金项目:国家高技术研究发展计划("863")项目(2011AA100606);吉林省教育厅"十三五"科学技术研究项目重点项目(吉教科合字[2016]179号);国家自然科学基金资助项目(31201237);吉林农业大学大学生创新创业项目(201610193046;201410193045);吉林省科技厅中青年领军人才及优秀创新团队项目(20111815);教育部博士点基金-青年教师基金项目(20122223120002)
摘    要:克隆红花脂质转运蛋白基因(Lipid transfer protein,LTP),并进行生物信息学及表达分析,旨为研究LTP在红花抵抗逆境胁迫中的作用提供依据。通过RT-PCR方法从红花种子中克隆LTP基因序列,通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析,构建LTP与相关物种LTP的系统进化树,利用Real-time PCR方法分析在红花不同号组织中LTP基因的表达量。结果显示,LTP基因ORF全长294 bp,编码97个氨基酸,相对分子量为7.46 kD,等电点为8.91。红花LTP蛋白包含一个长为29个氨基酸残基的信号肽序列;该蛋白含有一个丝氨酸磷酸化位点;三级结构预测表明该蛋白是由3个α-螺旋和一个β-转角简单的缠绕在无规则卷曲上的简单结构。分子进化表明,红花LTP基因与十字花科的甘蓝型油菜进化关系最近。通过荧光定量PCR对红花LTP基因的组织表达特异性进行分析,结果表明Ct LTP在不同组织的表达水平具有显著差异,在种子和花中呈现高表达,而在其他组织中低表达。

关 键 词:脂质转运蛋白  红花  荧光定量PCR  生物信息学分析
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