| 小鼠黑质双向凝胶电泳技术的优化 |
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| 引用本文： | 周长青,龙汉春,陈莹,万金城,马英,彭国光. 小鼠黑质双向凝胶电泳技术的优化[J]. 生物技术通报, 2010, 0(12) |
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| 作者姓名： | 周长青 龙汉春 陈莹 万金城 马英 彭国光 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院神经内科,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30370499) |
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| 摘 要： | 为了优化小鼠黑质双向凝胶电泳(2-DE)技术,比较了不同样品预处理方法、不同胶条和不同上样量对凝胶电泳结果的影响。研究发现,两种样品预处理方法均可顺利升至最高等电聚焦(IEF)电压(10000V)。与Clean-upkit法相比,TAC/丙酮沉淀法预处理后蛋白得率较低,同时丢失了样品中的部分中、小分子蛋白质。pH3-10L胶条中蛋白点主要分布在中间区域;pH3-10NL胶条对中间区域的蛋白点的分离有所改善;pH4-7胶条中蛋白点分布均匀,横条纹较少。80μg上样量的图谱背景干净,但点数最少(411);180μg上样量的图谱蛋白点较多(883),且圆润、清晰,背景干净,分辨率高;300μg上样量的图谱蛋白点虽然最多(904),但背景较深,部分蛋白点融合,横条纹也较多。研究表明,对于小鼠黑质蛋白质,使用Clean-upkit法对样品进行预处理,选取pH4-7的胶条,采用180μg的上样量能获得背景干净、分辨率高的双向电泳图谱,为帕金森病的生物标志物和药物靶点的研究打下了基础。
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| 关 键 词： | 黑质 双向电泳 蛋白质组学 |
Optimization of Seperation Technique for Substantia Nigra Protein of Mouse Using Two-dimensional Gel Electrophoresis |
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| Zhou Changqing,Long Hanchun,Chen Ying,Wan Jincheng,Ma Ying,Peng Guoguang. Optimization of Seperation Technique for Substantia Nigra Protein of Mouse Using Two-dimensional Gel Electrophoresis[J]. Biotechnology Bulletin, 2010, 0(12) |
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| Authors: | Zhou Changqing Long Hanchun Chen Ying Wan Jincheng Ma Ying Peng Guoguang |
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| Affiliation: | Zhou Changqing Long Hanchun Chen Ying Wan Jincheng Ma Ying Peng Guoguang(Department of Neurology,First Affiliated Hospital,Chongqing Medical University,Chongqing 400016) |
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| Abstract: | To optimize the two-dimensional gel electrophoresis(2-DE)technique for substantia nigra protein of mouse,we compared the effects of different sample preparation methods,different gels and different amount of protein loads to the 2-DE maps.Results showed that the isoelectric focusing(IEF)voltage(10 000 V)can be reached after the samples treated with TCA/acetone or Clean-up kit.Compared with Clean-up kit,the method of TCA/acetone lost the small and middle molecule weight proteins partially and the yields of w... |
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| Keywords: | Substantia nigra Two-dimensional electrophoresis Proteomics |
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