| 静水椎螺乙酰胆碱结合蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达、纯化与结晶 |
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| 引用本文： | 林波,孟海玲,吴勇,邴晖,长孙东亭,罗素兰.静水椎螺乙酰胆碱结合蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达、纯化与结晶[J].生物技术通报,2014(8). |
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| 作者姓名： | 林波 孟海玲 吴勇 邴晖 长孙东亭 罗素兰 |
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| 作者单位： | 海南大学热带生物资源教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(41366002);国家国际科技合作专项(2011DFR31210);海南省社会发展科技专项(SF201328);海口市重点科技计划项目(2013-16);长江学者和创新团队发展计划(IRT1123);海南省研究生创新科研课题(B201305,B201306) |
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| 摘 要： | 表达、纯化静水椎螺(Lymnaea stagnalis)乙酰胆碱结合蛋白(Ls-AChBP)并得到晶体。将静水椎螺乙酰胆碱结合蛋白cDNA序列克隆到表达载体pFastBac1上,构建了重组表达质粒pFastBac1-Ls-AChBP-His,经重组子筛选,得到重组杆状病毒质粒Bacmid,采用CellfectinⅡ脂质体,把带有外源基因的杆状病毒质粒Bacmid转染到昆虫细胞中,经镍柱和凝胶色谱柱对重组蛋白进行纯化得到五聚体,并用机器人进行结晶筛选获得其蛋白晶体。重组蛋白Ls-AChBP在Bac-to-Bac表达系统中得到高效表达并被纯化,结晶筛选得到晶体。
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| 关 键 词： | 静水椎螺乙酰胆碱结合蛋白 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统 重组表达 纯化 结晶 |
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