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无血清培养基生产重组人红细胞生成素的纯化
引用本文:李琳,邓继先,卢建申,周江. 无血清培养基生产重组人红细胞生成素的纯化[J]. 生物化学与生物物理进展, 1997, 24(2): 177-182
作者姓名:李琳  邓继先  卢建申  周江
作者单位:军事医学科学院生物工程研究所,北京 100071;军事医学科学院生物工程研究所,北京 100071;军事医学科学院生物工程研究所,北京 100071;军事医学科学院生物工程研究所,北京 100071
摘    要:用无血清培养基在生物反应器中培养CHO-EPO C2细胞株,培养上清中重组人红细胞生成素表达水平达10~21 mg/L.培养上清经过三步纯化后纯度可达到98%以上,比活性约为1.5×105 U/mg.纯化第一步使用反相柱层析,可将样品体积浓缩约30倍.取其收集液进行DEAE-离子交换柱层析,最后进行分子筛层析,全过程回收率为40%左右.SDS-PAGE表明,所制备终产品分子质量为35~40 ku,等电聚焦方法测其等电点在3.75~4.15之间,均属文献报道范围;ELISA和蛋白质印迹实验结果证明其具有天然红细胞生成素抗原性;采用溴化氰裂解方法做肽谱电泳,结果与理论推测相符.该纯化路线简单、迅速、高效,重复性好,可用于规模化生产临床使用重组人红细胞生成素.

关 键 词:重组人红细胞生成素,纯化,性质
收稿时间:1996-04-18
修稿时间:1996-08-12

Study of Purification of Recombinant Human Erythropoietin Produced with FBS-Free Medium
LI Lin,DENG Jixian,LU Jianshen and ZHOU Jiang. Study of Purification of Recombinant Human Erythropoietin Produced with FBS-Free Medium[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 1997, 24(2): 177-182
Authors:LI Lin  DENG Jixian  LU Jianshen  ZHOU Jiang
Affiliation:Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China;Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China;Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China;Institute of Biotechnology, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100071, China
Abstract:
Keywords:recombinant human erythropoietin   chromatography   purification
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