人骨骼肌α辅肌动蛋白(α-actinin)的提取及其抗血清的制备和鉴定 |
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作者姓名: | 李晓楠 卢鼎厚 |
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作者单位: | 北京体育学院运动生理教研室 |
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摘 要: | 本文提取人骨骼肌α辅肌动蛋白(α-actinin)是综合了文献报导有关提取兔肌α-actinin的和提取鸡胗α-actinin的方法,稍加修改而确定的。用Hasselbach-Schneider缓冲液提取骨骼肌中的肌球蛋白后,将残余物经硼酸-缓冲液提取、匀浆及高速离心去掉肌动蛋白和肌原纤维的其它成份,上清加硫酸铵至30%,35%饱合度所得的沉淀用220mmol/LTris-乙酸溶解、透析、离心后经DE-52柱层析可得电泳纯。α-actinin。将人骨骼肌α-actinin纯化制品免疫了三只大耳白纯种家兔,两个多月后,三只兔子都产生免抗人骨骼肌α-actinin的特异抗血清,用双向免疫扩散法和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定,产生的抗体效价较高,用双扩散法测定效价为1:32,用ELISA测定,用比率法判断结果,效价最高者为1:100,000左右,经免疫电镜观察结果证实,上述抗血清可以满足进一步实验要求。
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关 键 词: | 骨骼肌;α辅肌动蛋白;抗血清 |
收稿时间: | 1994-02-20 |
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