~(35)S-标记与DNA酶解片段核苷酸的顺序测定 |
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引用本文: | 琦祖和,宋松,熊伟军.~(35)S-标记与DNA酶解片段核苷酸的顺序测定[J].生物化学与生物物理进展,1986(4). |
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作者姓名: | 琦祖和 宋松 熊伟军 |
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作者单位: | 中国医学科学院基础医学研究所生化室,中国协和医科大学,中国医学科学院基础医学研究所生化室 北京,北京 |
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摘 要: | 末端终止法测定DNA分子内核苷酸排列顺序,常用~(32)P标记,Tris-H_3BO_3-EDTA(TBE)-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。在实际工作中都希望从有限的胶板上得到尽可能多的数据。Biggin及Hung等应用~(35)S-αATP标记和缓冲液梯度胶分离,大大改善了凝胶的分离状况,扩大了区带的可读范围。在乙型肝炎病毒(HBV)DNA顺序测定中,我们将~(35)S-dATP标记法用于0.5与2.5×TBE缓冲液梯度-8%聚丙烯酰胺凝胶分离,得到了良好的分离效果,顺序可读长度增加一倍以上,因而使较大片段的顺序测定能在一次克隆的样品中完成。
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